Osnove kulisa za sušenje smrzavanja (liofilizacija)
Liofilizacija, poznata i kao lažno sušenje, je proces koji se koristi za očuvanje biološkog materijala uklanjanjem vode iz uzorka, što podrazumeva prvo zamrzavanje uzorka i zatim sušenje pod vakuumom pri veoma niskim temperaturama. Liofilizirani uzorci se mogu čuvati mnogo duže od neobrađenih uzoraka.
Zašto se koristi liofilizacija
Liofilizacija ili sušenje bakterija bakterijom stabilizuje kulturu za dugotrajno čuvanje dok se minimizira oštećenja koja mogu biti uzrokovana strogo sušenjem uzorka.
Mnogi mikroorganizmi dobro preživljavaju kada se liofilizuju i mogu se lako rehidrirati i gajiti u medijima za kulturu, nakon dužeg vremenskog perioda skladištenja.
Liofilizacija se takođe koristi u biotehnološkoj i biomedicinskoj industriji radi očuvanja vakcina, uzoraka krvi, prečišćenih proteina i drugih bioloških materijala.
Ova kratka laboratorijska procedura može se koristiti sa bilo kojim komercijalno dostupnim zamrzivačem za očuvanje vaše kolekcije.
Proces liofilizacije
Proces liofilizacije je zapravo aplikacija fizičkog fenomena zvanog sublimacija: tranzicija supstance iz čvrstog u gasovito stanje, bez prve prolaze kroz tečnu fazu. Tokom liofilizacije, voda u zamrznutom uzorku uklanja se kao vodena para, bez prethodnog odmrzavanja uzorka.
Zajedne greške
Jedna od najčešćih grešaka kada je u pitanju liofilizacija nije poznavanje tačke topljenja uzorka, što otežava izbor tjelesnog liofilizatora.
Vaši uzorci se mogu rastopiti tokom procesa. Još jedna uobičajena greška je razmišljanje o tome da je hladnije kada je sušeno na zamrzivaču na sušilici za zamrzavanje. Tokom primarnog sušenja, potrebno je podesiti temperaturu polica ispod tačke evtektika uzorka. Trebalo bi da postoji dovoljno toplote za podsticanje molekula uzorka da se kreće - ali sprečite topljenje.
Treća greška koristi pogrešnu opremu za vaše uzorke. Pošto su sušari za zamrzavanje korišćeni u grupnoj postavci, trebalo bi da znate sledeće pre nego što ih kupite:
- Koliko vlage će biti liofilizovano
- Ono što je uzorak (i eutektička temperatura)
- Kako pravilno koristiti sušač za zamrzavanje
Ako se jedinica ne koristi pravilno, može uništiti sve uzorke. Što nas dovodi do druge česte greške: Ne održavanje vakuum pumpe. Pumpa mora biti u izvrsnom radnom stanju radi liofilizacije. Pokretanje pumpe sa balastom za gas otvoreno 30 minuta pre i nakon procesa sušenja sa zamrzavanjem povećava životni vek pumpe. Otvaranje balastne ploče čisti kontaminante iz pumpe kako bi se sprečilo oštećenje unutrašnjih komponenti. Često treba provjeriti ulje za pumpe za promjenu boje i čestice i zamijeniti ulje po potrebi. Redovne promene ulja održavaju pumpu na optimalnom vakuumu tokom procesa sušenja sa zamrzavanjem.
Na kraju, imati pogrešnu zamrzivačku dodatku za vaš liofilizacijski proces takođe može biti velika greška. Da li vam je potreban uzorak zatvarača ispod vakuuma? Zatim je potrebna komora za zaustavljanje. Da li se smrzavate u bocama? Onda budite sigurni da imate komoru za sušenje sa lukama.
Izbjegavanjem gorenavih grešaka možete osigurati bolju negu vašeg sušača za lijevanje i pumpu i imati bolje uzorke kada se završi sušenje sa zamrzavanjem.
Reference
Labconco News. "Top 5 greške napravljene u procesu liofilizacije". http://www.labconco.com/news/top-5-lyophilization-frequencies