Pufir natrijum citrata se koristi za izolaciju RNK jer on minimizira baznu hidrolizu ćelija RNK. Ovo ga čini važnim korakom u prečišćavanju mRNK tokom genomskih istraživanja ili za proučavanje transkripcije.
Buferi zasnovani na citratima takođe mogu da pomognu detekciji antigena u preparacijama fiksiranog tkiva jer rastavljaju unakrsne veze između antigena i fiksacionog medija.
Uz vodič ispod, napravite natrijum citratni pufer od pH 6. Upute su ne samo jednostavne, već i brzo izvršiti. Trebalo bi vam samo oko 10 minuta da završite ove korake.
Dve opcije da napravite bapper
Postoje dva načina za izradu pufera natrijum citrata. Prvo, odredite da li imate i limunsku kiselinu i konjugovanu bazu, natrijum citrat, za rad. Ako imate samo limunsku kiselinu, to nije problem. Još uvek možete napraviti pufer.
S druge strane, ako imate i kiselinu i bazu, kreirajte osnovno rješenje za svaku od njih. Mix 21 grama limunske kiseline u 1 litru destilovane vode i 29,4 grama natrijum citrata u 1 litru destilovane vode.
Ako imate samo limunsku kiselinu, mešajte 2,1 grama u samo 1 litru destilovane vode i pređite na sledeći korak.
Mešanje citronske kiseline i rastvora natrijum citrata
Sada kada ste stvorili svoje stock rešenje (ako ste imali kiselinu i bazu) ili pomešali svoju kiselinu u destilovanoj vodi (ako niste), možete se usredsrediti na vaša rešenja.
Obrišite 82 mililitara rastvora limunske kiseline sa 18 mililitara rastvora natrijum citrata.
Zatim napravite ukupnu zapreminu smeše do samo 1 litra destilovanom vodom. Ostavite dovoljno volumena da dopustite dodavanje natrijum-hidroksida (NaOH) u sledećem koraku.
Podešavanje pH
Dok nežno mešanje rastvora pomoću magnetne mešalice, koristite 1M natrijum hidroksid da bi se pH smeše prilagodio na 6.0. Nakon toga, finalnu zapreminu rastvora dovršite do 1 litra destilovanom vodom koristeći volumetrijsku bučinu.
Šta trebate učiniti za pufer
Ne samo da vam ne bi trebalo mnogo vremena da napravite pufer za natrijum citrat, takođe vam neće biti potrebno mnogo materijala. Sa limunskom kiselinom, 1M natrijum hidroksida, destilovanom vodom i kalibriranom pH sondom, bićete na pola puta. Korišćenje natrijum citrata je opciono.
Za postavljanje bafera biće potreban i 1-litarski diplomirani cilindar, 1-litarska volumetrijska količina i tri 1 litre medijske bočice. Na kraju, trebaće vam magnetna mešalica i magnetna mešalica.
Ako nemate sve ove materijale, razmislite o korišćenju laboratorije u svojoj školi ili na radnom mjestu, tako da ih ne morate sami kupiti. Takođe možete lako kupiti ove materijale na mreži ili posetiti prodavnicu specijalnih proizvoda u vašoj oblasti.